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발효산물 생산

제 1 일째 (1)알긴산 포괄고정화 효모의 조제(각자가 행한다) 1)100ml 비이커에 0.1M Cacl2 50ml를 채취하고, 얼음물...

제 1 일째

(1)알긴산 포괄고정화 효모의 조제(각자가 행한다)

1)100ml 비이커에 0.1M Cacl2 50ml를 채취하고, 얼음물 속에 정치하여 둔다.(뒤에 사용한다.)

2)20ml 비이커에 탈이온수 5ml를 채취하고, 비등직전까지 가열한다. 이 액에 알긴산 나트륨 0.1g을 액면에 균일하게 첨가한다. 알긴산 나트륨 분말이 충분히 습윤상태로 될 때 까지 방치한다. (약 5분간).

Microspatula를 사용하여 거품이 일지 않도록 조심스럽게 교반한다. 80。C 정도의 정도의 탕욕상 (100ml 의 비이커에 약 79ml)에서 교반하면 좋다.(알긴산 나트륨은 용해속도가 작기 때문). 균일 용액으로서 된 알긴산 나트륨 용액은 얼음물 중에서 냉각한다.

3)50ml 비이커에 압착 빵효모 1g을 넣고 이것에 미리 빙수욕중에서 냉각한 탈이온수 4ml를 가하여 충분히 현탁시킨다. 이 효모 현탁액을 2)에서 조제한 알긴산 나트륨 용액으로 옮겨 거품이 일지 않고 균일하게 될 때 까지 교반한다. (빙수욕 중). 이 현탁액을 Pasteur 피펫(앞끝이 빠져 있지 않은것)으로 채취하여 1)의 0.1M Cacl2 용액중(빙수욕 중)에 액면 중앙부 약 5cm 위로부터 방울상태로 떨어뜨린다. 효모-알긴산나트륨 액은 점도가 높으므로 Pasteur 피펫으로 흡인할 때에는 공기를 빨아들이지 않도록 주의한다. 10ml의 효모-알긴산나트륨 현탁액으로부터 200-300개의 알긴산 칼슘 gel beads(玉)(직경 3-4mm)가 조제 가능하다. 적하할때에도 거품이 gel 중에 들어가지 않도록 주의 한다. 비이커에 날짜, 실험자명을 적은 비닐 테이프를 붙인다. 랩으로 덮어씌우고 냉장고(±4°C)에서 하루에서(-3일)밤 정치하여 ,알긴산 칼슘 gel beads를 숙성 시킨다.

(b)제 2 일째

(1) 고정화 효모에 의한 에탄올 발효(4인분의 고정화 효모를 하나로 모은다.)

1)(a)(1)에서 조제한 알긴산 칼슘 고정화 효모를 망위에 모으고 pH 5.0의 0.01M MES-NaOH 완충액 (0.01M CaCl2 용액을 포함) 300ml로 씻는다. Petridish 위에서 재빠르게 고정화 효모를 칭량하여 기록한다. (4인분의 고정화 효모로서 약 20g )

2)칭량한 고정화 효모를 1)의 완충액 200ml를 넣은 300ml 비이커에 옮겨 ( 이조작에서는 큰 spatula를 사용한다. ) 실온에서 10분간 방치한다.

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자료제목 : 발효산물 생산

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키워드 : 발효산물,생산

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